南京醫科大學第一附屬醫院i期

Ⅰ 抗氧化與抗缺氧的聯系

摘要：目的觀察中葯合劑對缺氧大鼠腦組織的抗氧化保護作用。方法中葯合劑的主要成分為丹參、當歸、黨參、黃芪，生葯含量0.4 g/ml。以低壓艙減壓模擬缺氧，分別觀察低氧、常氧條件下中葯合劑對SD大鼠腦組織谷胱甘肽含量（GSH）、谷胱甘肽過氧化物酶（GSHPX）和過氧化氫酶（CAT）活性的影響，並檢測不同濃度中葯合劑在體外的抗羥自由基效力。結果①低氧暴露動物腦組織GSH含量下降，GSHPX和CAT活性降低（P＜0.01）。使用中葯合劑後，GSH與GSHPX顯著提高。②常氧狀態下，中葯合劑就可提高GSH含量與GSHPX活性。③體外實驗顯示中葯合劑能直接清除H2O2/Co2+體系中產生的羥自由基。結論 在該實驗條件下，中葯合劑對大鼠缺氧腦組織有一定的抗氧化神經保護作用。葯物的這種作用與其提高機體自身的抗氧化能力以及其直接的清除自由基作用有關。

關鍵詞：缺氧； 中葯合劑； 抗氧化； 谷胱甘肽過氧化物酶； 過氧化氫酶

Anti-oxidative Protective Effect of Chinese Herbal Mixture on Hypoxic Rat Brain

XIAO Feng, JIANG ZhengLin*, LI Xia, CHEN Jian, PAN YongJin, GU Yong-Jian, SHI Zhong-yuan

(Nantong University, Jiangsu Province 226001, China; Huaian Hospital Attached to Nanjing Medical University, Huaian 223000, China; Institute of Sea Engineering Sciences, Shanghai Jiaotong University, Shanghai 200231, China)

Abstract：ObjectiveTo observe the effect of Chinese herbal mixture against hypoxic brain in rats. MethodsHypoxic state was established in hypobaric chamber. We investigated the effects of Chinese herbal mixture on content of GSH, activities of GSH-PX and CAT of rat brain in both hypoxic and normoxic states. In another experiment, the hydroxyl radical scavenging activity of above mixture was measured in vitro using alizarin violet spectrophotometry.ResultsContent of GSH and activities of GSHPX and CAT all decreased significantly in hypoxic group, but GSH and GSHPX decreased less with pretreatment of Chinese herbal mixture. In normoxic state, GSH and GSH-PX were elevated with Chinese herbal mixture. In addition, Chinese herbal mixture scavenged hydroxyl radical in in vitro H2O2/Co2+ experimental system in a dosedependent manner. ConclusionThe results suggest the mechanisms are related to the Chinese herbal mixture of this study plays an antioxidative neuroprotective role on rat brain exposed to hypoxia, and that elevation of the activity of anti-oxidative enzyme GSHPX and the content of GSH, and a direct free radical-scavenging effect.

Key wordsHypoxia; Chinese herbal mixture; Anti-oxidation; GSH-PX; Catalaze

近年的實驗研究認為實施神經保護是預防和治療缺氧腦損傷的有效措施，尤其是抗氧化葯物的研製和應用已成為神經元損傷防治研究的熱點之一。國內外研製的許多西葯神經保護劑由於具有一定的毒副作用，臨床應用受到局限〔1〕。我國傳統中葯抗缺氧作用的研究表明，中葯具有作用溫和、保護作用和神經細胞損傷的多樣性相一致的特點，但目前研究限於單味葯的較多，對復方制劑抗氧化、清除自由基能力的報道不多。對丹參、當歸、黨參、黃芪等中葯的研究表明，它們均具有提高機體對缺氧的耐受性，清除氧自由基，降低血黏度，改善微循環等多種功能〔2,3〕。我們運用建立的低壓低氧模型，觀察預先給予上述葯物製成的合劑對缺氧腦損害的抗氧化保護作用及在體內、體外的抗自由基的能力，並分析其可能的作用機理，為臨床應用提供實驗依據。

1 材料和方法

1.1 材料 SD大鼠40隻，其中用於缺氧研究的24隻，由南通大學實驗動物中心提供，體重(240±20) g，分為常氧組（雄性5隻，雌性4隻）、低氧組（8隻，雌雄各半）、中葯合劑組（雄性4隻，雌性3隻）；用於常氧狀態研究16隻，購於上海復旦大學實驗動物科學部，體重(230±20) g，分成對照組和中葯合劑組，每組8隻，均雌雄各半。中葯合劑由上海交通大學海洋水下工程科學研究院提供，主要成分為丹參、當歸、黨參、黃芪，生葯含量0.4 g/ml。GSH，GSHPX，CAT試劑盒購自南京建成生物工程研究所。茜素紫（C20H12O7）Chroma公司生產，上海化學試劑站分裝廠分裝，其他試劑均為國產AR級。

1.2 方法

1.2.1 給葯方法中葯合劑組均於實驗（缺氧）前48，24，1 h腹腔內注射（i.p.）給葯，用量：1 ml/200 g・wt。其餘兩組注射等量的生理鹽水。

1.2.2 低氧暴露將中葯合劑組和低氧組動物放入低壓艙內（艙容積為0.01 m3），關閉艙門，調整艙內壓力，在1 h內分3階段將壓力減至相當於海拔8 040 m高度的空氣壓力（0～3 130～6 080～8 040 m）；在中間兩階段分別停留10及15 min，保持8 040 m高度的壓力5 h後加壓出艙，加壓時間10 min。常氧組作為實驗對照在艙邊常壓環境下停留6 h。

1.2.3 樣本制備中葯合劑組和低氧組出艙後與常氧組動物一起迅速斷頭，取左側腦組織，在0～4℃的冰冷生理鹽水中漂洗，除去血液，濾紙拭乾，稱重（約100～130 mg），加9倍量的0～4℃生理鹽水，在冰水浴中用玻璃勻漿器製成10％腦勻漿，用離心機3 000 r/min，離心15 min，吸取上清液備測。常氧實驗的對照組和中葯合劑組動物腦勻漿的制備於最後一次給葯後1 h進行。

1.3 檢測指標 GSH，GSHPX，CAT 3種指標的測定均依試劑盒說明書按步操作。Folin酚法測定腦勻漿的蛋白含量。利用改良茜素紫光度法檢測H2O2/Co2+體系產生的羥自由基，測定中葯合劑對羥自由基的清除率〔4〕。測定時按文獻〔5〕每個葯物濃度作3個平行樣，計算其平均值。

1.4 統計學處理腦勻漿的GSH，GSHPX，CAT測定結果用(±s)表示，用Stata6.0統計軟體對數據進行統計學處理，採用單因素方差分析，兩兩比較用Scheffe法。羥自由基清除率的數據採用非線性回歸的Four parameter logistic standard curve模擬，按下式計算EC50：y = min + (max - min) / (1 + (x / EC50)^Hillslope)。

2 結果

2.1 中葯合劑對缺氧處理後腦勻漿GSH，GSH-PX，CAT的影響結果見表1。

表1 中葯合劑對大鼠缺氧處理後腦組織GSH，GSH-PX，CAT的影響（略）

與常氧組比較，ΔP＜0.01；與低氧組比較，*P＜0.05；#P＜0.01

表1顯示，大鼠經低氧暴露後，腦組織GSH含量,GSH-PX和CAT活力3項指標均明顯降低（P＜0.01）。預先使用中葯合劑後，再經低氧暴露，此時三項指標均有所回升，與低氧組比較GSH與GSH-PX的改變有統計學意義（P＜0.05或P＜0.01），但與常氧組比較降低仍很明顯（P＜0.01）。結果表明中葯合劑有一定的抗氧化神經保護作用。

2.2 中葯合劑對常氧狀態下腦勻漿GSH，GSH-PX，CAT的影響結果見表2。

表2 中葯合劑對常氧狀態下腦組織GSH，GSH-PX，CAT的影響（略）

與生理鹽水組比較，*P＜0.05,**P＜0.01;n=8

表2顯示，與生理鹽水組比較，中葯合劑組GSH，GSH-PX，CAT都有所升高，僅GSH，GSH-PX的改變有統計學意義（P＜0.05或P＜0.01）。表明常氧狀態下，中葯合劑能提高腦組織的GSH水平和GSH-PX活力，增強腦組織的抗氧化能力。

2.3 中葯合劑在體外抗羥自由基的作用結果見圖1。如圖1所示，中葯合劑在體外對羥自由基的清除率和葯物濃度有明顯的量-效關系，即濃度越大，清除效果越佳，但達到一定的濃度後即趨向飽和。根據計算，清除反應體系中50%的羥自由基，中葯合劑的濃度(EC50)為：0.07 ml/10 ml，摺合生葯濃度為2.8 mg/ml。

圖1 羥自由基的清除率與葯物濃度量-效關系（略）

3 討論

研究表明缺氧腦損傷是一個復雜的病理生理過程，涉及多種神經遞質系統功能紊亂、細胞內鈣超載、一氧化氮及自由基的神經毒性及炎性損害等機制。其中自由基急劇增高是缺氧時的重要病理生理基礎〔6〕。正常情況下，人體內自由基不斷產生，又不斷被清除。腦缺氧時，機體內存在的氧化-抗氧化系統失衡，形成惡性循環，從而導致自由基在體內的大量堆積。清除自由基、抗氧化制劑可分為酶類自由基清除劑和非酶類自由基清除劑兩大類。酶類自由基清除劑主要有超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-PX）、過氧化氫酶（CAT）。本文結果顯示，缺氧導致腦勻漿中GSH-PX ，CAT活性及GSH含量下降，表明腦組織內抗氧化體系的抗氧化能力降低，而中葯合劑能明顯地降低缺氧時GSH含量和GSH-PX活力的下降程度，提高腦組織的抗氧化能力，有助於減輕腦缺氧損傷狀況。通過進一步實驗，我們發現中葯合劑在正常狀態下，亦能提高腦組織的GSH-PX 活性和GSH含量。並且，體外抗羥自由基實驗顯示，中葯合劑還具有直接的清除羥自由基的作用，且具有劑量依賴關系。這些結果表明，腦缺氧時若使用中葯合劑具有抗缺氧神經保護作用，這一葯效可能與組方中的葯物提高機體抗氧化酶的活力，以及自身就具有的清除氧自由基的作用有關。GSH具有重要的生理功能，它能通過GSH-PX還原體內不斷生成的脂質過氧化物和過氧化氫，以消除它們對酶和膜蛋白上巰基的氧化作用，維持細胞及組織的正常功能及代謝〔7〕，而反應中生成的GSSG可以經谷胱甘肽還原酶所催化，利用磷酸戊糖旁路所生成的還原型輔酶Ⅱ（NADPH）重新還原成GSH缺氧時，由於過氧化物生成的速度大大超過細胞內NADPH的生成速度，使得GSH/GSSG的比值下降，並導致GSH-PX活性下降造成氧化應激，而GSH-PX是一種含硒的酶，在腦中含量高，和超氧化物歧化酶(SOD)協同處理自由基的過程中起主要作用，是主要的H2O2清除酶〔8〕，可清除線粒體和胞質中產生的H2O2，從而防止羥自由基(・OH)的產生。羥自由基的化學性質非常活潑，被認為是對生物體危害最大的自由基〔9〕，它和自由基清除劑及組織發生反應的能力都很強，這樣，很高濃度的自由基清除劑才能有效果。實際上，自由基清除劑在很高濃度時，往往產生明顯的副作用，這限制了許多葯物的應用〔10〕，但中葯有很大的優越性，其作用溫和，並且作用環節多，各環節之間可能還會產生協同作用。綜上所述，在本實驗條件下，中葯合劑對大鼠缺氧腦組織有一定的抗氧化神經保護作用，這種作用與葯物提高機體自身的抗氧化能力及其直接的清除自由基作用有關。本研究為這一中葯合劑用於抗缺氧腦損傷提供了重要的參考依據。

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基金項目：2003年江蘇省高校自然科學基金資助項目（No.03KJD310185)

(南通大學，江蘇 南通 226001; 南京醫科大學附屬淮安第一醫院，江蘇 淮安 223000;上海交通大學海洋水下工程科學研究院，上海 200231)

Ⅱ 南京江寧醫院怎麼樣

南京市江寧醫院（南京醫科大學附屬江寧醫院）創建於1935年，環境優美，設備一流，技術先進，設施配套，是集醫療、教學、科研、預防、保健、康復為一體的綜合性三級醫院、愛嬰醫院、江寧區紅十字醫院，江蘇省、南京市、江寧區醫保定點醫院，南京醫科大學附屬醫院，東南大學、江蘇大學、第二軍醫大學教學醫院。
南京市江寧醫院開設病床800張，設標准病區(含ICU病房)21個，設有36個臨床專科、15個醫技科室，創傷、微創、腫瘤、碎石、腦病、介入、內窺鏡、血液透析、高壓氧等9個中心，2個分院和1個門診部。區臨床醫學檢驗中心、區牙病防治所、區眼病防治所和南京市急救中心江寧分站均設在南京市江寧醫院；並是衛生部推廣項目：顱內血腫微創清除技術協作醫院。

醫院現有萬元以上醫療設備500餘台(套)，較大型先進的醫療設備主要有核磁共振、16排螺旋CT、8排螺旋CT、數字化拍片系統(DR)、多功能數字化X光機、大型全自動生化分析儀、電化學發光免疫分析儀、尿沉渣儀、多功能彩色B超、電子胃鏡、腸鏡、十二指腸鏡、病理圖像分析系統、體外振波碎石機、鈥激光碎石機、電動顱鑽、腫瘤治療機組、血透機組、高壓氧艙、中央監護站、高檔麻醉機、呼吸機、手術床等當今一流的醫療設備，以及按國際標准配備一流設備的層流凈化手術室、ICU病房，醫療設備總價值近億元。
南京市江寧醫院所屬呼吸內科、胸外科、腫瘤科為南京市重點專科，神經內科、心血管內科、腦外科、骨科、泌尿外科、婦產科、兒科、血液透析科為區級重點科室，有7名區級名醫。醫院學術氛圍濃厚，科研成果顯著，多個科研項目分別獲得省、市、區科技成果獎。

南京市江寧醫院_網路
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Ⅲ 哪些大學有中醫系，分數線大概多少

上海中醫葯大學38點1分。北京中醫葯大學37點9分。
中醫葯大學是指以培養中國傳統醫學人才為特色的醫科類高校，中醫葯大學數量一般是一省一校，而且各地的中醫葯大學都有自己的獨有特色。中醫葯院校和西醫院校，在當前院校設置里區別非常大，中醫葯大學是一個相對獨立的體系。
2017年入選雙一流工程的中醫葯大學有北京中醫葯大學，天津中醫葯大學，上海中醫葯大學，南京中醫葯大學，廣州中醫葯大學，成都中醫葯大學。